主流造模方法是通过外科手术结扎小鼠冠状动脉，模拟血管阻塞。以下是经口插管开胸结扎法的关键步骤概要：

▶ 实验材料：

 • C57小鼠（雄性，6-8周）

 •  阿佛丁（厂家：南京爱贝生物科技有限公司）

 •  通用型小动物麻醉机（厂家：瑞沃德 型号：R580S）

▶ 造模方法：

1、适应性喂养7天，小鼠按照阿佛丁0.2ml/10g麻醉。

2、颈部剪开，钝性分离出气管，经口插管，连接呼吸机，用先调整好的参数，小鼠呼吸频率112，吸呼比1：1，潮气量2.4, 钝性分离胸腔左侧肌肉，暴露肋间，从第3肋和第4肋间撕开肌肉，暴露心脏，轻轻撕开一点心包膜，用6-0带线缝合针于左心耳与动脉圆锥之间进针，心电图ST抬高表示结扎成功，之后缝合好肋间肌肉和胸腔肌肉，过5-10分钟撤掉呼吸机，待老鼠恢复自主呼吸，放置于笼内。

3、造模完成后1-2周取材。

▶ 评价指标：TTC染色，Masson染色，HE染色，ELISA检测

1. 模型验证

 ♦ TTC染色

TTC染色结果：活心肌细胞内的脱氢酶可将TTC还原为红色，而坏死心肌因酶活性丧失呈苍白色。

 ♦  Masson染色

Masson染色结果：胶原纤维被染成蓝色，心肌细胞呈红色。正常组当中，少量胶原存在于心肌细胞间隙、血管周围。模型组组织结构异常，心肌及间质纤维化，胶原沉积呈蓝色，心肌组织间形成局部纤维瘢痕，这是评估心肌纤维化的关键方法。

♦  HE染色

HE染色结果：与正常组相比，模型组组织疏松水肿，炎细胞浸润，毛细血管增生；坏死的肌纤维被疏松纤维结缔组织取代，部分视野血管明显扩张。

♦  ELISA检测

ELISA结果显示：模型组的血清MYO和CKMB浓度均显著高于正常组，验证了此造模方法的有效性。