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ELISA实验中做好标曲为什么这么重要
酶联免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作，可以简单地回答样本中有多少蛋白质/多肽/抗体这一基本问题，是科研中比较常用的一种检测方法。而这种简单的分析方法的核心，就是标准曲线。没有它，我们的实验就变成了一个二元的“是/不是”测试。有了它，我们可以深入研究生物反应的细节。那么，是什么使得标准曲线如此强大呢?让我们在ELISA的背景来讨论这个问题。 简单地说，标准品就是一系列已知目标蛋白数量的阳性对照。例如，如果对人类IgG进行ELISA检测，标准曲线将包含逐渐减少的已知量的人类IgG，它会让你立刻得出一系列的结论。 1.我的EL
2022-08-01
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NF-κB经典信号通路
NF-kB(核因子激活的B细胞的k-轻槌增强)在细胞因子诱导的基因表达中起关键性的调控作用，它调控的基因编码：急性期反应蛋白、细胞因子、细胞粘附分子、免疫调节分子、病毒癌基因、生长因子、转录和生长调控因子等。通过调控多种基因的表达，NF-kB参与免疫反应、炎症反应、细胞凋亡、肿瘤发生等多种生物进程。 NF-kB家族有由cRel, RelA (p65) , RelB, NF-kB1 (p50)、NF-kB2 (p52)组成,它们在N端都具有Rel同源结构域，其中cReI, ReIA (p65)和ReIB存在转录激活区(TAD)，可正向调节基因表达；p52和p50分别由前体蛋白p100、
2022-07-21
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PCR、qPCR、RT-PCR、Real-time PCR区别浅析
PCR技术介绍： 聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）是在体外酶促扩增特定DNA片段的技术，由美国Kary Mullis及其同事于1985年发明。热稳定性Taq DNA聚合酶的应用和自动化装置的发明与完善，使PCR技术进入实用阶段。该技术的发明和广泛应用，大大推动了分子生物学各相关学科的发展，发明者也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。 随着PCR技术的成熟，派生了不少相关技术。这类技术具有敏感、特异、快速和简单等优势，在微生物检验中的应用越来越广，不少国家将其纳入检验的标准方法；
2022-07-13
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PD-1人源化小鼠模型介绍
品系背景∶C57BL/6N 品系构建策略∶ 在小鼠PD-1基因位点敲入人源PD-1胞外域序列，保留小鼠跨膜域和胞内域，构建嵌合型PD-1人源化小鼠模型。 品系说明∶ hPD-1在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。 PD-1胞外域人源化，利于hPD-1靶向药物的识别。 保留小鼠PD-1胞内域，保证正常的胞内信号转导。 小鼠靶基因不表达，避免交叉反应。 小鼠的免疫系统功能健全。 研究应用∶ 本模型可用于评估hPD-1靶向药物在免疫健全小鼠体内的有效性及安全性∶ 与人源化肿瘤细胞系联用 例如∶与MC38-hPD-L1肿瘤细胞
2022-05-23
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简述铁死亡与慢性病铁代谢调控机制
铁是人体必需的微量元素，不仅参与血红素合成，而且作为一些关键酶的辅基在多种生理代谢中发挥重要功能。铁缺乏可引发缺铁性贫血。人类遗传性血色病是一类由基因突变引 起的铁过载疾病，导致多个器官中铁积累，皮肤色素沉积及多种器官的病变，如2型糖尿病、 肝纤维化等。超过85% 血色病患者携带遗传性血色素沉着病蛋白（hemochromatosis protein，HFE）突变基因, 少数患者携带铁调素(hepcidin，HAMP)、 铁调素调节蛋白(hemojuvelin,HJV)、铁外排蛋白(ferroportin 1,FPN)或转铁蛋白受体(transferrinreceptor,TFR)2突变基因，近
2022-05-23
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炎症因子白介素6
白介素-6 白细胞介素是非常重要的细胞因子家族，截至2022年，得到承认的成员已达40个；它们在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用，此外白细胞介素还参与机体的多种生理及病理反应。 白细胞介素6(interleukin6, IL-6)是细胞因子网络中的重要成员，在急性炎症反应中处于中心地位。白介素6于1980年由Weissenbach发现，是一种多功能细胞因子，在人体代谢、自身免疫细胞分化、疾病治疗等方面都有重要作用。 IL-6结构特性 IL-6是小分子多肽，由四个α螺旋组成。分子量为19-28KD,具有184个氢基酸残基，
2022-05-23
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转化生长因子β（transforming growth factor beta）（第二章）
TGF-β信号通路 TGF-β通过TGF-βI型受体（TGF-βRI或ALK5）和TGF-βII型受体（TGF-βRII）触发信号传导，这两种受体都是跨膜丝氨酸/苏氨酸激酶受体。 与TGF-β结合后，TGF-βRII作为高亲和力的TGF-β受体招募并磷酸化TGF-βRI的胞内结构域，形成异四聚体，随后激活下游信号的SMAD蛋白。 SMAD依赖的经典通路是TGFβ信号传导的核心部分。哺乳动物中有8种SMAD蛋白分为三类，包括受体相关SMADs（R-SMADs）、协同SMADs（co-SMADs）和抑制性SMAD（I-SMADs）。 TGF-β与受体结合
2022-05-23
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转化生长因子β（transforming growth factor beta）（第一章）
转化生长因子β （TGF-β） 的最初发现是因为它能刺激大鼠成纤维细胞株的生长。近三十年来，TGF-β得到了进一步深入的研究，尤其是其在肿瘤微环境 （TME） 中的双重作用，即被称为“TGF-β悖论”，可为亦正亦邪的存在。 在早期肿瘤中，TGF-β通路诱导细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖。相反，到晚期，它通过调节基因组不稳定性、上皮间质转换 （EMT） 、新血管生成、免疫逃避、细胞运动和转移等方面具有促进肿瘤的作用。TGF-β作为一种免疫抑制细
2022-05-23
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