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实验动物如何采血及采血管的选择
实验动物采血 在实验研究中，经常会采集实验动物血液用于分析和评估动物体内的生理和病理情况。根据不同的实验设计和要求及动物的特性和生理差异，选择合适的采血方法，可以减少动物伤害，提高实验的成功率和结果的可靠性。今天小编给大家普及下实验动物采血方法及采血管的选择。 01 大鼠、小鼠采血方法 尾尖采血（剪尾采血） 采血方法：动物麻醉后并固定，将鼠尾在45-50℃温水中浸泡数分钟，也可用二甲苯等化学药物涂擦，使局新血管扩张。擦干尾部，用酒
2023-07-27
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WB实验之内参选择
免疫印迹（Western Blot）在研究蛋白相关实验中是关键技术，由于实验周期较长、步骤繁琐，影响因素较多，在实验过程中经常会遇到各种难题。我们需要追根求源，查找并修复问题。今天我们讲解下WB实验中内参的选择。 什么是内参及内参的作用 内参即是内部参照（Internal control），是指在组织和细胞中表达相对稳定的一类蛋白质，通常由管家基因编码。这些蛋白质被用作检测蛋白表达水平变化时的参照物，以确定实验的准确性和可重复性。 在Western Blot实验中，我们使用内参其实就是使用与内参对应的抗体来检测内参的
2023-06-14
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ELK Biotechnology总结Elisa实验中细胞样本的制备与保存
细胞培养上清 ①将细胞培养上清液吸入离心管中，在2-8℃下以1000×g离心20分钟，除去细胞碎片和杂质，收集上清液备用， ②样本保存在-20℃或-80℃，避免反复冻融。 01 uniprot Q:那什么情况下需要测细胞裂解液，什么情况下是检测细胞培养液上清呢？ A:首先从细胞培养的形态（贴壁细胞、悬浮细胞）所检测蛋白分泌表达位置： 在uniprot蛋白数据库中Subcellular Location 栏
2022-12-13
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支原体简易检测法
Trizol 法抽提待检测细胞的RNA（推荐使用 TRIpure总RNA提取试剂 货号：EP013），反转录为CDNA 后裔支原体 检测引物PCR 检测细胞支原体污染情况。 支原体检测引物 Mycoplasma_F01 GGG AGC AAA CAG GAT TAG TAT CCC T Mycoplasma_R01 TGC ACC ATC TGT CAC TCT GTT AAC CTC 40 cycles，63
2022-06-23
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玩转uniprot数据库
一、Uniprot蛋白数据库介绍及使用详解 Uniprot数据库是资源最广、信息最丰富的蛋白质数据库，是查询蛋白功能的首选数据库。Uniprot数据库由Swiss-Prot、TrEMBL和PIR-PSD三大子数据库构成，数据主要来自于各物种基因组测序完成后得到的全基因蛋白质序列，并包含了很多来自文献中的蛋白及其功能信息。尤其是swiss-prot 子数据库，库中蛋白质信息都是手工核对过的 ，非冗余， 有详细注释信息的蛋白数据。作为一名科研工作者，Uniprot数据库的使用技能应该是必备的技能之一。 （1）UniProtKB（UniProt Knowledgebase）是蛋白质序列、
2022-06-07
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RNA样本准备指南
1、样本RNA得率以及各类项目最低起始量 各样本Total RNA得率统计（仅供参考）： 测序项目推荐起始量（起始量仅供参考，外泌体不允许18s/28s rRNA有峰）： 表达谱芯片及小RNA测序体液样本及外泌体项目起始量（仅供参考） 2、各类样本准备指南 2.1 动物组织/临床组织采集 ① 取新鲜组织，组织体积要小，尽量长宽高≤0.5cm，考虑到可操作性，所切组织块的大小可参考绿豆颗粒的大小 ② 去除非研究的组织类型（如结缔组织，脂肪组织等），如果是临床病变组织的取材要正确判断病变以及正常组织，应将病变组织
2022-06-06
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浅析免疫共沉淀(Co-IP)原理和详细实验步骤教程
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结
2022-06-06
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什么是ELISA--原理与分类
一、基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。 这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗
2022-05-23
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