组织匀浆定义：将分化的细胞群用物理机械手段或其它方法，使细胞破碎，细胞内容物释放，与细胞碎片形成的固液混合形式的浓稠液体。

一、取适量组织块，用预冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.4）冲洗，去除表面残留的血液与杂质。（很多用户疑惑，这个适量，到底是多少？ELISA试剂盒检测中：血清或细胞上清样本用量100μL/指标（单孔）；组织用量15mg/指标（单孔），差不多干枯绿豆大小。 ）具体老鼠各器官大小可见下图。

二、将组织块称重，再剪切成尽可能的小碎块，以便充分匀浆；

三、可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入 5-10ml预冷PBS(组织与 PBS 的质量体积比建议为 1:9，即1g 样本加入 9ml PBS)进行充分研磨（有条件实验室可选用机器匀浆），该过程需在冰上进行；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理（超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复 2 次）。

玻璃匀浆器

超声波细胞破碎仪

超声波细胞破碎仪能用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎，同时可用来乳化、分立、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等，在医学、军事、工业、农业上有很多的应用。

1、在破碎的过程中会大量的产热，一般的都是冰浴下破碎；

2、切记空载，一定要将超声变幅杆插入样品后才能开机；

3、变幅杆（超声探头）入水深度：15mm左右，液面高度最好有25mm以上，探头要居中，探头不能碰到容器壁和底。超声波是垂直纵波，插入太深不容易形成对流，影响破碎效率；

1）时间：超声时间每次最好不要超过5秒，间隙时间应大于或等于超声时间，以便于热量散发。时间设定应以超声时间短，超声次数多原则，可延长超声机子以及探头的寿命；

2）超声功率：不宜太大，以免样品飞溅或起泡沫。如小于10ml样品容量，功率应在200w以内；10-200ml样品容量的功率在200－400w；200ml以上的样品容量功率在300-600w之间；

3）容器选择：有多少的样品就选多大的烧杯，这样也是有利样品在超声中对流，提高破碎效率。例如；20ML的处理量最好用25ML的烧杯；

如10ml细胞匀浆样品设置参数:100W，60次，超声3秒，间隙5秒 (总时间为8分钟)。

5、若样品放在1.5ml的EP管里请一定要将EP管固定好，以防冰浴融化后液面下降导致空载；

6、日常保养：用完后用酒精擦洗探头或用清水进行超声；

7、使用超声波细胞破碎仪微探头时，振幅调节不得超过70%，否则会造成探头损坏。

四、将制备好的匀浆液于5000×g 离心 5分钟，留取上清即可检测。

五、如果样本需要长期保存，请添加蛋白酶抑制剂。根据实验需要，组织匀浆样本可先定量总蛋白，以便于统计分析数据。某些组织样本肾脏，脑组织会有假阳性反应。处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程，由于蛋白容易变性，降解，故该过程应尽量温和。样本处理之后的储存也非常重要，尤其注意不要反复冻融，样本处理之后可分装密封保存， 4℃保存应小于 1 周，-20 ℃不应超过 1 个月，-80℃不应超过3个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。